親水C18色譜柱在用于分離疏水性化合物與常規(guī)的C18相具有相似的選擇性,所以也可以作為一種通用C18柱使用。它是專為親水性和極性化合物具有更強(qiáng)的保留能力和選擇性而設(shè)計(jì)的。
須注意以下事項(xiàng):
1、新親水C18在使用前,須先用甲醇或乙腈試劑以20倍柱體積低流速?zèng)_洗,作用是使固定相能充分潤(rùn)濕、碳鏈?zhǔn)嬲梗股V柱的性能達(dá)到好狀態(tài)。具體操作是,將配制好65%的乙腈/水沖洗后,把入口端連接在色譜儀上,出口端放空(不可連上檢測(cè)器,以免污染了檢測(cè)器),以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速將柱中的清稀溶液吹干,過(guò)20分鐘后再接上檢測(cè)器,以1.0ml/min的流速,繼續(xù)沖洗2~8小時(shí);
2、液相色譜儀檢測(cè)分析樣品完畢后,須沖洗色譜柱。尤其是流動(dòng)相中含有酸或鹽時(shí),需將柱中的酸或鹽沖洗干凈,通常建議用10%甲醇水沖洗20倍柱體積;
3、若色譜柱處于長(zhǎng)期閑置狀態(tài)時(shí),要將其沖洗,建議沖洗3-4小時(shí)以上,后保存在純有機(jī)試劑或高比例的有機(jī)試劑溶液(如90%甲醇水)中;
4、由于親水C18的固定相疏水性較強(qiáng),在使用過(guò)程中盡量不要使用高水相條件,若水相比例過(guò)高易引起固定相疏水塌陷,引起柱效迅速下降,甚至造成不可逆的負(fù)面影響;由于碳載量高,表現(xiàn)尤為明顯,建議使用過(guò)程中水相比例不超過(guò)90%。